1905年—1907年，以孙中山为首的革命派和以康有为、梁启超为首的改良派展开大论战时，鲁迅站在革命一边，发表了《摩罗诗力说》，《文化偏至论》等重要论文。1909年与周作人一起合译《城外小说集》介绍外国文学。同年回国后，先后在杭州、绍兴任教。辛亥革命后，曾任南京临时政府和北京政府教育部部员，佥事等职，兼在北京大学、女子师范大学等校授课。
1918年5月，首次用“鲁迅”的笔名，大胆揭露人吃人的封建礼教，奠定了新文学运动的基石。五四运动前后，参加《新青年》杂志工作，站在后帝反封建的新文化运动最前列，猛烈抨击封建文化与封建道德，并同早期共产主义者李大钊等一起反对资产阶级知识分子的妥协，投降倾向，成为“五四”新文化运动的伟大旗手。
1918年到1926年，陆续创作出了《呐喊》、《坟》、《热风》、《彷徨》、《野草》、《朝花夕拾》、《华盖集》、《华盖续集》等专集，表现出爱国主义和彻底革命民主义的思想特色。其中1921年12月发表的中篇小说《阿Q正传》，是中国现代文学史上杰出的作品之一。在此期间鲁迅开始接触马列主义。 1926年8月，因支持北京爱国学生运动，为反动当局所通辑，南下到厦门大学任教。“四一·二”反革命政变后，愤而辞去中山大学职务。1927年10月到上海，认真研究马列主义理论。
1930年起，先后参加中国自由运动大同盟，中国左翼作家联盟和中国民权保障同盟，不顾国民党政府的种种迫害，积极参加革命文艺运动，介绍马克思文艺理论，在中国共产党的领导下，和其他文艺战士一起，同国民党政府御用文人及其他反动文人。反动文学进行不懈的斗争，粉碎了反动派的文化“围剿”。而共产主义者鲁迅，正是在这一围剿中，成了中国文化革命的伟人。 1936初“左联”解散后，他响应党的号召，积极参加文化界和文艺界的抗日民族统一战线。
从1927年到1935年，创作了《故事新编》中的大部分作品和大量的杂文。后十年的杂文，是以马克思主义思想为指导，创造性的、深刻地分析了各种社会问题，表现出高瞻远瞩的政治远见和韧性的战斗精神，这些作品收集在《而己集》、《三闲集》、《二心集》、《南腔北调集》、《伪自由书》、《准风月谈》、《花边文学》、《且介亭杂文》等专集中。
鲁迅的一生，对中国的文化事业作出了巨大贡献；他领导和支持了“未名社”、“朝花社”等进步文学团体，主编了《国民新报副刊》（乙种）、《莽原》、《奔流》、《萌芽》、《译文》等文艺期刊；热忱关怀、积极培养青年作者；大量翻译外国进步文学作品和介绍国内外著名的绘画、木刻；搜集、研究、整理大量古典文学，批判地继承了祖国古代文化遗产，编著《中国小说史略》、《汉文学史纲要》，整理《嵇康集》辑录《会稽稽群故事杂书》、《古小说钩沈》、《唐宋传奇集》、《小说旧闻钞》等等。
1936年10月19日病逝于上海。1938年出过《鲁迅全集》（10卷）、《鲁迅译文集》（10卷）《鲁迅日记》（2卷）《鲁迅书信集》，并重印鲁迅编校的古籍各种，1981年又出版《鲁迅全集》（16卷）。 1956年，鲁迅遗体《上海虹桥万国公墓移葬虹口公园，毛泽东亲自为重建的鲁迅墓题字。北京、上海、绍兴等地先后建立了鲁迅博物馆、纪念馆。